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钟鼎生物的多抗定制开发平台拥有经验丰富的抗体制备技术人员、完善的抗体生产设施、先进的抗体制备技术,能够向广大用户提供价廉物美,品质优异的多克隆抗体制备技术服务,包括多克隆抗体制备,除了宿主的不同外,免疫原也是多种多样,偶联后的多肽、天然或重组蛋白、全菌抗原、小分子抗原,每种抗原都有其自身的特性。


钟鼎 NPZoon™ 多克隆抗体制备服务特色



自主研发的可溶蛋白表达技术帮助表达高纯度,高可溶性蛋白抗原。
在农药、小分子化合物、重金属抗原的偶联和免疫检测方面拥有核心技术。
包括小鼠、大鼠、、猴、在内的多样化宿主可供选择。
标准型、快速型、保证型等多类型定制服务满足客户的实际需求。


多克隆抗体制备流程 

多克隆抗体制备流程
抗原准备 1-2周 客户提供抗原
1、游离多肽10mg
2、重组蛋白5-8mg 80%以上纯度
3、偶联小分子
4、全菌/多糖/灭活病毒等
钟鼎提供抗原
1、设计并合成多肽,偶联KLH或BSA
2、重组蛋白表达
3、小分子半抗原改造及偶联
动物免疫 6-7周 可选免疫物种
1、rabbit(2只)
2、BALB/C Mouse(10只)
3、Boer goat(1只)
4、roman hens(2只)
标准型免疫流程
免疫动物准备
免疫前采血
免疫3-4次
最终采血
抗体纯化 1-2周 抗原亲和纯化
纯化血清中针对抗原的特异性抗体,纯度可达95%以上
Protein A/G 亲和纯化
纯化血清中所有的IgG,得率高,纯度可达95%以上
硫酸铵沉淀法纯化
初步纯化血清中所有的IgG,纯度可达85%以上
应用检测 1-2周 ELISA检测
保证效价大于1:100000
Western Blot
Co-IP
IHC
抗体应用开发
抗体偶联标记
抗体片段化


抗原设计——免疫原制备

    抗体制备过程中存在一个常见问题,即宿主免疫产生的抗体与免疫原有特异性的反应,但应用于Western Blot/IP/IHC/IF时经常出现阴性实验结果,从而浪费了宝贵的时间和经费。这种遗憾主要来自于抗原设计不合理,依据当前的抗体制备技术水平,更好的办法是提高抗原特异性。我们会通过分析抗原分子的性质来设计免疫原性更好的抗原,为您提供更高品质的抗体。

抗原分析及设计

*抗原指数分析
*暴露位点分析
*亲疏水分析
抗原分析及设计

多肽抗原设计原则

*选择合适的氨基酸数量
*优先选择N端或C端的多肽序列
*选择免疫原性好并且暴露位点多的区域
多肽抗原

服务提示

    抗体制备服务过程,存在着一个令人困扰的遗憾,即产生的抗体与免疫抗原有着非常特异的、灵敏的反应,但是对于检测抗原,Western Blot经常出现阴性实验结果,浪费了宝贵的时间和经费。这种遗憾来主要来自于抗原设计不合理,依据当前的抗体设计及制备技术水平,更好的办法就是提高抗原特异性,抗体技术专家建议以下方案:
A、使用多肽为抗原时,分析抗原的亲水性和疏水性,预测蛋白序列膜外区和胞内区。尽量使用亲水性且裸露在膜外的多肽区域,必要时选择两条以上的多肽作为抗原。
B、尽量使用天然蛋白或重组蛋白(部分区域)作为免疫抗原,可以大大提高抗原的特异性,减少遗憾。
C、设置实验节点,例如实验前的文献检索、三免之后的抗血清检测,尽量避免可能存在的风险。



相关服务

五大系统 蛋白抗原制备
标记效率检测 抗体标记
八大质控原则 ELISA试剂盒开发

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