蛋白质N-端测序服务

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蛋白质N-端测序服务

几乎所有的蛋白合成都起始于N-端,蛋白质N-端的序列组成对于蛋白质整体的生物学功能有着巨大的影响力。例如N-端序列影响蛋白质的半衰期,同时关联着蛋白亚细胞器定位等,这些与蛋白的功能和稳定性息息相关,对蛋白进行N-端测序分析,有利于帮助分析蛋白质的高级结构,揭示蛋白质的生物学功能。

目前对蛋白N端测序主要分类两大类,其一为非质谱技术,例如经典的Edman降解法、利用反转录RT-PCR得到对应蛋白的cDNA,再来反推得到蛋白序列;其二为质谱技术。各自都有其使用的长处和制约之处,目前,市面上采用的,依然是基于经典的Edman降解法原理,利用美国ABI公司Procise491蛋白序列测序系统进行蛋白N-端测序。

蛋白质(多肽)N-端测序检测技术服务
服务编号 服务项目 周期 报价
BA101 蛋白质N-端测序 1-2周 2500元起(含5AA)

蛋白质N-端测序服务说明

基于Edman降解法原理进行蛋白质N-端测序,从理论上不可避免的受到两种条件制约,会很大程度上影响蛋白测序质量:
1、样品纯度不能太低,经验认为纯度大于90%的蛋白才适用于测序反应。
2、N端封闭或糖基化的蛋白质难以进行Edman反应,无法测序。

蛋白质N端测序服务送样要求

1、可以提供蛋白冻干粉,蛋白溶液,也可以是固定在PVDF膜上的蛋白(NC膜不可以)。如果提供转膜的蛋白质,需去离子水充分洗涤干净,同时保证每条膜上蛋白量大于1ug。
2、请确保蛋白浓度大于1mg/ml, 最小量不得低于10Pmol,蛋白纯度最好大于90%,测序样品不返还,请保留备份。(注:50KD的蛋白,10Pmol为0.5ug)。
3、蛋白溶液不含盐,缓冲液,变性剂(SDS)等杂质,如果使用缓冲液请务必标明样品缓冲液的成分,样品最好溶解在10-30微升的挥化性的溶剂中,或者为冻干样品。
4、如果已知蛋白表观分子量或理论的蛋白质序列,请说明以提高测序成功率。