特色文库资源 · Gateway® 技术 · 核体系酵母双杂交文库 稀有物种

油茶 (Camellia oleifera) 酵母双杂交文库

完成日期:2022/04/29 物种:Camellia oleifera (油茶) / 根组织 授权状态:需客户授权
知识产权与授权声明
本文库由钟鼎生物基于客户样本构建,版权及相关知识产权归原始建库客户所有。目前平台展示该文库信息仅为促进科研合作与资源共享。任何单位或个人如需使用本文库进行筛选或商业应用,须通过钟鼎生物与原建库客户协商并签署授权协议。如有合作意向,请联系我们获取授权支持。
1.28×10⁷
次级文库库容 (CFU)
满足下游筛选需求
100%
重组率
24/24克隆均为阳性插入
>1000 bp
平均插入片段长度
覆盖全长cDNA范围 0.1–4 kb
1.44×10⁷
初级文库库容 (CFU)
初级重组率100%

文库质量总览

基于 Invitrogen Gateway® 技术构建,无PCR偏好性,完整保留转录组信息

✅ 文库构建结论:本实验以油茶根组织为起始材料,成功构建核体系酵母双杂交文库。经全面质控:初级文库库容 1.44×10⁷ CFU,重组率100%;次级文库库容 1.28×10⁷ CFU,重组率100%;电泳检测平均插入片段长度 >1000 bp。各项指标均达到高质量文库标准,可用于下游酵母双杂交筛选及木本油料作物分子生物学研究。

适用方向:油茶根系发育与养分吸收、抗逆(干旱/贫瘠)信号通路、油脂合成与代谢调控网络。

关键实验步骤与质控数据

完整流程包括 mRNA分离 → ds cDNA合成 → BP重组建初级库 → LR重组建次级库

mRNA 分离质检

mRNA 分离结果
图1 mRNA 分离结果 – 弥散条带最亮区>1000bp,质量合格

mRNA富集效果理想,满足建库要求。

ds cDNA 合成 & 分级分离

双链cDNA电泳
图2 双链cDNA电泳 – 弥散条带集中于0.1~4 kb,覆盖全长信息

采用SMARTer技术避免PCR扩增偏差,cDNA经分级柱收集,确保大片段富集。

初级文库库容 & 重组率鉴定

初级文库库容量平板 (Kan抗性)
图3 初级文库库容量平板 (Kan抗性) – 单克隆计数1800/稀释板,计算库容1.44×10⁷
初级文库重组率电泳
图4 初级文库重组率电泳 – 24/24克隆均插入片段,重组率100%,平均片段>1000bp

次级文库库容 & 重组率鉴定

次级文库库容量平板 (Amp抗性)
图5 次级文库库容量平板 (Amp抗性) – 库容1.28×10⁷ CFU
次级文库重组率
图6 次级文库重组率 – 24/24阳性,重组率100%,插入片段>1000bp

完整质控参数

依据严格质控标准,每一份文库均提供可追溯数据

质控项目初级文库 (pDONR222)次级文库 (pGADT7-DEST)
库容量 (CFU)1.44 × 10⁷1.28 × 10⁷
重组率100% (24/24)100% (24/24)
平均插入片段长度>1000 bp>1000 bp
插入片段范围0.1 – 4 kb (弥散分布)
转化方法电转化 DH10B 感受态
载体抗性KanamycinAmpicillin
适用筛选方法共转化 / mating 筛选

※ 所有质控数据均存档于原始实验报告中,可提供完整电泳图谱。

钟鼎生物特色文库平台优势

稀有资源 + 知识产权合规化运营

严格质控体系

每一批文库均进行库容、重组率、插入片段多重质控,确保交付即用。

知识产权合规合作

特色文库均需通过授权机制使用,平台提供对接服务,确保合法合规。

一站式互作服务

从文库筛选、点对点验证(酵母回转、Co-IP、Pull-down、BiFC)到下游功能分析,无缝衔接。

丰富物种经验

已完成昆虫、水生生物、药用植物、木本油料等稀有物种文库200+,成功率>99% 。

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