基于 Invitrogen Gateway® 技术构建,无PCR偏好性,完整保留转录组信息
✅ 文库构建结论:本实验以瑟伯氏棉根、茎、叶混合组织为起始材料,成功构建核体系酵母单杂交文库。经全面质控:初级文库库容 1.20×10⁷ CFU,重组率100%;次级文库库容 1.04×10⁷ CFU,重组率100%;电泳检测平均插入片段长度 >1000 bp。各项指标均达到高质量文库标准,可用于下游酵母单杂交筛选及棉属转录因子-DNA互作研究。
适用方向:棉属进化与驯化机制、野生棉抗逆调控网络、次生代谢转录调控研究。
完整流程包括 mRNA分离 → ds cDNA合成 → BP重组建初级库 → LR重组建次级库
mRNA富集效果理想,满足建库要求。
采用SMARTer技术避免PCR扩增偏差,cDNA经分级柱收集,确保大片段富集。
依据严格质控标准,每一份文库均提供可追溯数据
| 质控项目 | 初级文库 (pDONR222) | 次级文库 (pGADT7-DEST) |
|---|---|---|
| 库容量 (CFU) | 1.20 × 10⁷ | 1.04 × 10⁷ |
| 重组率 | 100% (24/24) | 100% (24/24) |
| 平均插入片段长度 | >1000 bp | >1000 bp |
| 插入片段范围 | 0.1 – 4 kb (弥散分布) | |
| 转化方法 | 电转化 DH10B 感受态 | |
| 载体抗性 | Kanamycin | Ampicillin |
| 适用筛选方法 | 酵母单杂交筛选 | |
※ 所有质控数据均存档于原始实验报告中,可提供完整电泳图谱。
稀有资源 + 知识产权合规化运营
每一批文库均进行库容、重组率、插入片段多重质控,确保交付即用。
特色文库均需通过授权机制使用,平台提供对接服务,确保合法合规。
从文库筛选、点对点验证(酵母单杂交、EMSA、ChIP)到下游功能分析,无缝衔接。
已完成昆虫、水生生物、药用植物、野生棉等稀有物种文库200+,成功率>99% 。
从文库到验证,加速您的研究