Multi-Tag 蛋白

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Western Blot 没有信号,是样本的问题还是系统的问题?一个可靠的阳性对照,能帮你在几分钟内做出判断。钟鼎生物最新推出 Multi-Tag 蛋白产品,能更好地作为 Western Blot 实验的阳性对照,检测电泳是否成功。下面有详细的产品参数和使用案例,欢迎选购。

📋 本文内容速览
  1. 产品概述:为什么需要 Multi-Tag 蛋白
  2. 产品参数一览
  3. 使用案例
  4. 实验操作建议
  5. 常见问题解答(FAQ)
PART 01产品概述:为什么需要 Multi-Tag 蛋白

在 Western Blot 实验中,从制胶、上样、电泳、转膜、封闭、抗体孵育到显色,任何一个环节出现问题都可能导致最终无信号。而"无信号"这个结果本身,并不能告诉你问题出在哪里。

Multi-Tag 蛋白作为阳性对照,其核心价值在于帮助定位问题

1对照有信号,目的样本无信号

说明电泳、转膜、显色等系统环节正常,问题可能出在目的蛋白表达量低、抗体不识别或样本处理不当上。

2对照也无信号

说明问题在实验系统本身——可能是转膜失败、抗体失活、显色体系异常或电泳条件有误。

核心价值:Multi-Tag 蛋白含有多种常见标签表位,可被多种标签抗体识别,因此它可以作为"通用型"阳性对照。无论你用什么标签抗体,都可以用它来验证实验体系是否正常。

PART 02产品参数一览
蛋白名称 Multi-Tag 蛋白,用于 SDS-PAGE 或 Western Blot 阳性对照
货号 ZD20200004
表达宿主 大肠杆菌
纯度 >90%(SDS-PAGE)
Predicted N terminal Met
分子量 Multi-Tag 蛋白由 672 个氨基酸组成,预测分子量为 76.29 kDa。
缓冲液 Liquid in 0.8 mg/ml in PBS pH 7.4
保存 样品自收到之日起在 -20℃ 至 -80℃ 下稳定 12 个月。收到后,在 -20℃ 至 -80℃ 的无菌条件下储存。建议将蛋白质等分成较小的量,以优化储存。避免反复冻融循环。
注意事项 仅供实验室使用。如果您对分析证书有任何疑问,请联系我们的客户服务代表,电话 400-066-8086(免费)。

规格小结:76.29 kDa 的分子量在 SDS-PAGE 上位置清晰,便于与目的蛋白区分;纯度 >90% 保证对照条带干净;PBS 缓冲液体系兼容常见上样缓冲液,使用方便。

PART 03使用案例

下图为 Multi-Tag 蛋白在 Western Blot 实验中的实际检测结果,可见清晰的特异性条带,证明该产品可作为可靠的阳性对照使用。

Multi-Tag蛋白使用案例
图1 Multi-Tag 蛋白 Western Blot 检测结果
💡 案例解读

从结果可以看出,Multi-Tag 蛋白在预期分子量位置呈现清晰、单一的条带,背景干净,无明显降解或杂带。这意味着:① 蛋白本身完整性和纯度良好;② 电泳和转膜条件正常;③ 抗体识别有效。当你的目的蛋白无信号时,用这个对照可以快速排除系统性问题。

PART 04实验操作建议

为了让 Multi-Tag 蛋白发挥最佳的对照效果,建议按以下要点操作:

1上样量建议

根据检测灵敏度调整上样量。一般建议每孔上样 10-50 ng,可根据显色体系的灵敏度适当调整。上样量过大可能导致条带过饱和,过小则信号偏弱。

2避免反复冻融

收到产品后建议立即分装成小份,-20℃ 至 -80℃ 保存。每次取用一管,避免反复冻融导致蛋白降解或聚集。

3与目的样本同时处理

Multi-Tag 蛋白应与目的样本在同一块胶、同一张膜上处理,经过相同的电泳、转膜、封闭、抗体孵育和显色流程。这样对照才有意义。

4选择合适的抗体

Multi-Tag 蛋白含有多种常见标签表位,可根据你手头已有的标签抗体选择检测方案。如果使用 His 标签抗体、GST 标签抗体等均可识别。

使用提示:如果实验结果中 Multi-Tag 对照条带清晰,而目的蛋白无信号,建议从目的蛋白表达量、抗体特异性、样本处理三个方面排查。如果 Multi-Tag 对照也无信号,则重点检查转膜效率、抗体活性和显色体系。

PART 05常见问题解答(FAQ)
Multi-Tag 蛋白有什么用途?
Multi-Tag蛋白主要用于SDS-PAGE和Western Blot实验的阳性对照,帮助判断电泳和转膜过程是否成功。当目的蛋白未检测到信号时,如果Multi-Tag对照有清晰条带,说明实验体系本身没有问题,问题出在目的蛋白或抗体上;如果Multi-Tag对照也无信号,则说明电泳、转膜或显色环节存在系统性问题。
Multi-Tag 蛋白的分子量和纯度是多少?
Multi-Tag蛋白由672个氨基酸组成,预测分子量为76.29 kDa。纯度大于90%(SDS-PAGE检测)。表达宿主为大肠杆菌,N端预测为Met。产品为液体形式,缓冲液为0.8 mg/ml的PBS pH 7.4。
Multi-Tag 蛋白应该怎么保存?
样品自收到之日起在-20℃至-80℃下稳定12个月。收到后,在-20℃至-80℃的无菌条件下储存。建议将蛋白质等分成较小的量,以优化储存。避免反复冻融循环,否则可能导致蛋白降解或聚集。
为什么 Western Blot 需要设置阳性对照?
Western Blot实验环节多,从制胶、上样、电泳、转膜、封闭、抗体孵育到显色,任何一步出问题都可能导致最终无信号。设置阳性对照的意义在于将问题定位在系统层面还是样本层面:若阳性对照有信号而目的样本无信号,问题在目的蛋白或特异性抗体;若阳性对照也无信号,问题在实验系统本身。Multi-Tag蛋白作为通用阳性对照,含有多种常见标签表位,可被多种标签抗体识别。
Multi-Tag 蛋白可以用于哪些下游实验?
Multi-Tag蛋白主要作为SDS-PAGE和Western Blot的阳性对照使用。此外,由于其含有多个标签表位,也可用于抗体特异性和灵敏度的验证实验,以及检测转膜效率和显色体系是否正常。不建议将其用于功能性实验或免疫原性研究。

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