Western Blot 没有信号,是样本的问题还是系统的问题?一个可靠的阳性对照,能帮你在几分钟内做出判断。钟鼎生物最新推出 Multi-Tag 蛋白产品,能更好地作为 Western Blot 实验的阳性对照,检测电泳是否成功。下面有详细的产品参数和使用案例,欢迎选购。
在 Western Blot 实验中,从制胶、上样、电泳、转膜、封闭、抗体孵育到显色,任何一个环节出现问题都可能导致最终无信号。而"无信号"这个结果本身,并不能告诉你问题出在哪里。
Multi-Tag 蛋白作为阳性对照,其核心价值在于帮助定位问题:
说明电泳、转膜、显色等系统环节正常,问题可能出在目的蛋白表达量低、抗体不识别或样本处理不当上。
说明问题在实验系统本身——可能是转膜失败、抗体失活、显色体系异常或电泳条件有误。
核心价值:Multi-Tag 蛋白含有多种常见标签表位,可被多种标签抗体识别,因此它可以作为"通用型"阳性对照。无论你用什么标签抗体,都可以用它来验证实验体系是否正常。
| 蛋白名称 | Multi-Tag 蛋白,用于 SDS-PAGE 或 Western Blot 阳性对照 |
| 货号 | ZD20200004 |
| 表达宿主 | 大肠杆菌 |
| 纯度 | >90%(SDS-PAGE) |
| Predicted N terminal | Met |
| 分子量 | Multi-Tag 蛋白由 672 个氨基酸组成,预测分子量为 76.29 kDa。 |
| 缓冲液 | Liquid in 0.8 mg/ml in PBS pH 7.4 |
| 保存 | 样品自收到之日起在 -20℃ 至 -80℃ 下稳定 12 个月。收到后,在 -20℃ 至 -80℃ 的无菌条件下储存。建议将蛋白质等分成较小的量,以优化储存。避免反复冻融循环。 |
| 注意事项 | 仅供实验室使用。如果您对分析证书有任何疑问,请联系我们的客户服务代表,电话 400-066-8086(免费)。 |
规格小结:76.29 kDa 的分子量在 SDS-PAGE 上位置清晰,便于与目的蛋白区分;纯度 >90% 保证对照条带干净;PBS 缓冲液体系兼容常见上样缓冲液,使用方便。
下图为 Multi-Tag 蛋白在 Western Blot 实验中的实际检测结果,可见清晰的特异性条带,证明该产品可作为可靠的阳性对照使用。
从结果可以看出,Multi-Tag 蛋白在预期分子量位置呈现清晰、单一的条带,背景干净,无明显降解或杂带。这意味着:① 蛋白本身完整性和纯度良好;② 电泳和转膜条件正常;③ 抗体识别有效。当你的目的蛋白无信号时,用这个对照可以快速排除系统性问题。
为了让 Multi-Tag 蛋白发挥最佳的对照效果,建议按以下要点操作:
根据检测灵敏度调整上样量。一般建议每孔上样 10-50 ng,可根据显色体系的灵敏度适当调整。上样量过大可能导致条带过饱和,过小则信号偏弱。
收到产品后建议立即分装成小份,-20℃ 至 -80℃ 保存。每次取用一管,避免反复冻融导致蛋白降解或聚集。
Multi-Tag 蛋白应与目的样本在同一块胶、同一张膜上处理,经过相同的电泳、转膜、封闭、抗体孵育和显色流程。这样对照才有意义。
Multi-Tag 蛋白含有多种常见标签表位,可根据你手头已有的标签抗体选择检测方案。如果使用 His 标签抗体、GST 标签抗体等均可识别。
使用提示:如果实验结果中 Multi-Tag 对照条带清晰,而目的蛋白无信号,建议从目的蛋白表达量、抗体特异性、样本处理三个方面排查。如果 Multi-Tag 对照也无信号,则重点检查转膜效率、抗体活性和显色体系。
猜您想看:
相关服务