AKTA，是生物分子纯化领域的"标准装备"。AKTA 系统是专门用于生物分子纯化的平台，集成了液相层析系统、软件和预装柱，可高效准确地实现多类生物分子的纯化过程。AKTA 系列中 AKTAprime 是适用于实验室的小型自动液体色谱系统，专为标准分离应用而设计。本文系统介绍 AKTAprime 系统的七大组成部件、四种常见纯化方法及 AKTA 系统的核心优势，附纯 CSS 配图和操作建议，供大家参考。
- AKTAprime 系统总览
- AKTAprime 七大组成部件
- AKTA 纯化系统工作原理
- 四种常用纯化方法：凝胶过滤、离子交换、疏水作用、亲和层析
- AKTA 系统的核心优势
- 使用注意事项
- 常见问题解答（FAQ）
AKTA 系统是专门用于生物分子纯化的平台，集成了液相层析系统、软件和预装柱，可高效准确地实现多类生物分子的纯化过程。AKTA 系列中 AKTAprime 是适用于实验室的小型自动液体色谱系统，专为标准分离应用而设计。
ÄKTAprime 蛋白质纯化系统包括下列部件，每个部件在纯化流程中承担着不同的功能。
建立梯度
样品或缓冲液
压力保护
体积可选
注射样品
电导率/pH
收集组分
缓冲液阀用于选择要使用的缓冲溶液，用于系统泵施加大的样品体积。梯度转换阀用于建立梯度。
系统泵用于经系统运送液体，如样品或缓冲溶液，将液体经缓冲液阀、梯度转换阀或经上样阀进入流动通道。
压力传感器可以测量在位液体压力，还可用作压力保护装置。
混合器用于混合两元梯度，以两步将溶液混合以得到最适宜的结果，混合器的体积可以选择。
上样阀用于装加样环和用于将样品注射到柱上。
检测器的目的是测量流出柱后液体的 UV 吸收、电导率和 pH（任选），用于这些测量的流动池安装在系统的右侧。
分部收集器用于将样品组分收集在管中供进一步分析，分流阀在废液和收集管之间转换流向。
AKTA 系统实现物质分离的基础是使用不同的纯化填料，在常规的纯化方法基础上提供了液体流动动力和液体成分检测功能，使整个纯化过程中的流速、流量、上样、检测、收集实现自动控制，使整个分离纯化更可控和精确一些。
AKTA 的填料根据待分离物质的性质而进行选择，常见的纯化方法有四种。
| 纯化方法 | 分离依据 | 原理 | 适用场景 |
|---|---|---|---|
| 凝胶过滤层析 | 分子大小 | 不同分子量的物质通过凝胶柱的速度不同，大分子先流出，小分子后流出 | 分子量差异较大的样品分离、脱盐、缓冲液更换 |
| 离子交换层析 | 电荷性质 | 带电溶质分子与介质中可交换离子进行交换，通过盐浓度梯度或pH变化洗脱 | 电荷性质不同的蛋白分离、高分辨率纯化 |
| 疏水作用色谱 | 疏水性 | 高盐浓度下蛋白结合到疏水凝胶上，降低盐浓度时被洗脱 | 疏水性差异明显的蛋白分离、离子交换后的补充纯化 |
| 亲和层析 | 特异性相互作用 | 利用蛋白与配基之间的特异性相互作用进行分离 | 带标签蛋白纯化（His、GST等）、抗体纯化 |
可以快速的分离、检测、纯化多种生物样品，如蛋白、多糖、生物碱和生物酸等。
能够实现条件摸索，通过软件精确控制流速、梯度、上样量等参数。
仪器配合软件，极大提高的工作效率，减少人工成本。
核心优势总结：AKTA 系统实现了从"手动层析"到"自动层析"的跨越。① 适用广——覆盖蛋白、多糖、生物碱、生物酸等多种样品；② 控制精——流速、梯度、上样、检测、收集全自动控制；③ 效率高——软件配合仪器，减少人工干预，提高重复性。
- 缓冲液脱气：缓冲液需要脱气处理，避免气泡进入系统影响检测和泵的运行。
- 样品预处理：上样前样品需要离心或过滤，避免颗粒堵塞柱子。
- 柱子选择：根据目标蛋白性质选择合适的层析柱和填料。
- 压力保护：注意压力保护，避免超压损坏系统。
- 收集判断：收集组分时根据 UV 吸收峰判断，必要时进行 SDS-PAGE 验证。
- 系统清洗：使用后及时清洗系统，避免残留物影响下次实验。
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