酵母双杂交文库构建技术服务

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服务概述

酵母双杂交能反映不同蛋白质在活细胞内的相互作用,以简便、灵敏和高效等特点在基因功能的研究中得到了广泛的 应用。钟鼎可提供适用于胞浆蛋白、核蛋白及膜蛋白的酵母双杂交实验服务,我们具有丰富的酵母双杂交技术服务的经验, 可以很好的帮助客户分析并解决在实验过程中遇到的各种问题。


酵母双杂交文库构建报价

基本实验步骤 详细实验步骤 周期 服务报价
样品RNA提取 1)Total RNA提取
2)mRNA分离
5天
5天
在线询价
cDNA文库构建 3)cDNA合成与接头连接
4)cDNA按长度分离
5)重组到酵母双杂交载体pGADT7上和电转化
6)文库检测和质粒提取
7)数据整理和分析
3天
3天
10天
5天
3天

Gateway 建库样品标准

Gateway建库服务样品标准
样本类型 总量 完整度/新鲜度 0D260:280 0D260:230 运输/储存
Total RNA 300-500ug 28S:18S=2:1 1.9-2.1 1.9-2.1 干冰/-80℃
拟南芥
拟南芥
>4g 新鲜冻存     干冰/-80℃
动物组织
动物组织
>1g 新鲜冻存     干冰/-80℃
细胞
细胞
>1.0*107 去除培养液加上裂解液/新鲜冻存     干冰/-80℃
种子
种子
>8g 新鲜冻存     干冰/-80℃
烟草
烟草
>4g 新鲜冻存     干冰/-80℃
根茎
根茎
>8g 新鲜冻存     干冰/-80℃
水稻叶片
水稻叶片
>4g 新鲜冻存     干冰/-80℃

Smart 建库样品标准

Smart 建库服务样品标准
样本类型 总量 完整度/新鲜度 0D260:280 0D260:230 运输/储存
Total RNA >2ug 28S:18S=2:1(无基因组污染) 1.9-2.1 1.9-2.1 干冰/-80℃
拟南芥
拟南芥
>10mg 新鲜冻存     干冰/-80℃
动物组织
动物组织
>10mg 新鲜冻存     干冰/-80℃
细胞
细胞
>1.0*107 去除培养液加上裂解液/新鲜冻存     干冰/-80℃
种子
种子
>20mg 新鲜冻存     干冰/-80℃
烟草
烟草
>10mg 新鲜冻存     干冰/-80℃
根茎
根茎
>20mg 新鲜冻存     干冰/-80℃
水稻叶片
水稻叶片
>10mg 新鲜冻存     干冰/-80℃
纤毛虫
纤毛虫
>200mg 新鲜冻存     干冰/-80℃
水蛭
水蛭
>100mg 新鲜冻存     干冰/-80℃

交付标准

Gateway 建库 Smart 建库
初级文库质粒 200ug 初级文库菌液*3 文库质粒 200ug 文库菌液*3
次级文库质粒 200ug 次级文库菌液*3 单双杂载体及菌株
单双杂载体及菌株 建库报告
Gateway 建库报告
建库报告
Smart 建库报告

部分客户发表文章

1、OsSHI1 Regulates Plant Architecture Through Modulating the Transcriptional Activity of IPA1 in Rice.The Plant Cell.DOI: 10.1105/tpc.19.00023(IF=9.6)

2、ERECTA1 Acts Upstream of the OsMKKK10-OsMKK4-OsMPK6 Cascade to Control Spikelet Number by Regulating.The Plant Cell.DOI: 10.1105/tpc.17.00959(IF=9.6)

3、CsMYB60 directly and indirectly activates structural genes to promote the biosynthesis of flavonols and proanthocyanidins in cucumber.Hortic Res. doi: 10.1038/s41438-020-0327-z.(IF=5.4)

4、A Novel NAC Transcription Factor,PbeNAC1, of Pyrus betuifoliaConfers Cold and Drought Tolerancevia Interacting with PbeDREBs andActivating the Expression ofStress-Responsive Genes.Frontiers.DOI: 10.3389/fpls.2017.01049.(IF=4.6)

案例展示

1.样品RNA提取

样品RNA提取


2.二链合成结果

二链合成结果


3.初级文库插入片段重组率鉴定

初级文库插入片段重组率鉴定

重组率:24/24*100%=100%
重组率:重组成功数量/克隆总数*100%    平均长度:>1000b


初级文库库容量鉴定(库容量>107

初级文库库容量鉴定


4.次级文库插入片段重组率鉴定

次级文库插入片段重组率鉴定

重组率:24/24*100%=100%
重组率:重组成功数量/克隆总数*100%    平均长度:>1000bp


次级文库库容量鉴定(库容量>107

次级文库库容量鉴定



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