无标签蛋白纯化-无标签重组蛋白表达-钟鼎生物

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亲和标签是目前用于重组蛋白表达纯化中最常用的手段。但是在蛋白的结构解析研究或体外诊断试剂的研究等方面，亲和标签可能会给研究带来不利影响，所以往往需要接近天然蛋白的无标签蛋白。为此，钟鼎生物推出无标签蛋白表达纯化服务，我们既可以采用融合sumo标签再切除的方法、也可以直接表达无标签蛋白，满足不同客户的实际需求。

服务详情

项目名称	交付内容	周期	价格
90%纯度无标签蛋白纯化	无标签蛋白表达菌株、质粒质检报告	5周	询价
95%纯度无标签蛋白纯化	无标签蛋白表达菌株、质粒质检报告	6周	询价

方案案例展示

第一步.硫酸铵沉淀粗纯蛋白。

样品	硫酸铵比例	沉淀条件	离心条件	沉淀重溶缓冲液
细菌破碎上清	20%，40%，60%，80%	0℃，搅拌	13000rpm，15min，4℃	50mM Tris-HCl，pH8.0

第二步.离子交换层析纯化蛋白。

样品	填料	流速	结合缓冲液(ProtA)	洗脱缓冲液(PortB)	梯度
40%硫酸铵沉淀组分	SP Separose^TM Fast Flow，5mL	1mL/min	50mM Tris-HCl，pH8.0	50mM Tris-HCl，1M NaCl，pH8.0	0%B运行30mL，0%-100%B运行100mL，100%B运行30mL

第三步.分析蛋白的亲疏水性，蛋白亲水性较强，尝试疏水层析纯化提高纯度。

样品	填料	流速	洗脱缓冲液(PortB)	结合缓冲液(ProtA)	梯度
离子交换层析纯化洗脱组分透析后样品	Phenyl Beads 6FF，5mL	1mL/min	50mM Tris-HCl，pH8.0	50mM Tris-HCl，1.5M NaCl，pH8.0	100%B运行30mL，100%-0%B运行100mL，30%B运行30mL