AKTA蛋白纯化系统

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蛋白纯化方法选择

  AKTA系统是专门用于生物分子纯化的平台,集成了液相层析系统、软件和预装柱,可高效准确的实现多类生物分子的纯化过程。AKTA系列中AKTAprime是适用于实验室的小型自动液体色谱系统,专为标准分离应用而设计。

认识AKTAprime系统

AKTAprime系统

ÄKTAprime蛋白质纯化系统包括下列部件:
1.缓冲液阀和梯度转换阀
  缓冲液阀用于选择要使用的缓冲溶液,用于系统泵施加大的样品体积。梯度转换阀用于建立梯度。
2.系统泵
  系统泵用于经系统运送液体,如样品或缓冲溶液,将液体经缓冲液阀、梯度转换阀或经上样阀进入流动通道
3.压力传感器
  压力传感器可以测量在位液体压力,还可用作压力保护装置。
4.混合器
  混合器用于混合两元梯度,以两步将溶液混合以得到最适宜的结果,混合器的体积可以选择。
5.上样阀
  上样阀用于装加样环和用于将样品注射到柱上。 
6.检测器
  检测器的目的是测量流出柱后液体的UV吸收、电导率和pH(任选),用于这些测量的流动池安装在系统的右侧。
7.具有分流阀的分部收集器
  分部收集器用于将样品组分收集在管中供进一步分析,分流阀在废液和收集管之间转换流向。

AKTA纯化系统原理

  AKTA系统实现物质分离的基础是使用不同的纯化填料,在常规的纯化方法基础上提供了液体流动动力和液体成分检测功能,使整个纯化过程中的流速、流量、上样、检测、收集实现自动控制,使整个分离纯化更可控和精确一些。
  AKTA的填料根据待分离物质的性质而进行选择,常见的纯化方法有:
  凝胶过滤层析,也称为分子筛,根据分子的大小而进行分离,不同分子量的物质通过凝胶柱的速度不同,进而得到分离。
  离子交换层析,通过带电的溶质分子与离子交换层析介质中可交换离子进行交换,从而达到分离纯化的目的。物质由于静电作用而结合到凝胶上,再采用盐浓度梯度或者跟换缓冲液pH进行洗脱。
  疏水作用色谱,蛋白、多肽类的样品在高盐浓度下可以结合到疏水凝胶上,当盐浓度降低时,样品被洗脱。
  亲和层析,利用蛋白、多肽与某些配基之间的特异性相互作用而进行分离。

AKTA系统的优点

1.可以快速的分离、检测、纯化多种生物样品,如蛋白、多糖、生物碱和生物酸等;
2.精确的控制系统,能够实现条件摸索;
3.仪器配合软件,极大提高的工作效率,减少人工成本。

 

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