蛋白质纯度HPLC测定

  ◎当前位置:首页>>技术服务>>蛋白质理化及互作研究>>蛋白质纯度HPLC测定
服务概述

蛋白质纯度HPLC测定

  分析蛋白质的纯度,最简单的办法还是SDS-PAGE,SDS-PAGE的电泳分离度非常高,例如两个蛋白相差1KD,都可以在SDS-PAGE胶上体现出来,但是由于蛋白染料考马斯亮蓝染色的灵敏度不高,蛋白含量小于0.1ug以下的杂蛋白,一般显色效果比较差,无法在SDS-PAGE上体现,大多数的纯度分析软件,只能做到粗略的计算。使用HPLC分析,根据蛋白质保留时间的差异分离蛋白质以测定蛋白纯度,灵敏度较高,是比较精确的蛋白质纯度测定方法。

尺寸排阻色谱(SEC)根据蛋白质的流体力学半径来进行蛋白质的分离,对于大多数的球状蛋白而言,直接正比于其分子量。该方法通常用于确定单克隆抗体产物的单体、高分子量聚集体和低分子量片段的含量。与SDS-PAGE不同,SEC不会破坏蛋白分子的三维结构,适合分离和定量非共价的聚集体形式。由于该技术具有较高的通量,可以兼容不同的检测器(紫外检测器、光散射或者荧光检测器),且容易验证,SEC已经成为工艺开发过程中的主要技术。

抗体纯度分析方法 SEC-HPLC峰图
蛋白质纯度HPLC测定技术服务
服务编号 服务项目 周期 报价
BA106 蛋白质纯度HPLC测定 1-2周 询价

蛋白质分子量测定送样要求

1、请确保蛋白浓度大于0.5mg/ml, 不得少于500ul,蛋白固体需大于200ug,分析样品不返还,请保留备份。
2、含盐量:挥发性无机盐<20mM;不挥发性无机盐<5mM;样品应不要添加任何保护剂或其他物质。