SPR技术(Surface Plasmon Resonance,表面等离子共振技术)可以提供实时的、非标记的分子相互作用信息,监控整个分子间的结合过程,并计算出分子之间的亲和力(KD)、结合速率(ka)、解离速率(kd) 等重要数据;用于各类小分子化合物、多肽、蛋白质、寡核苷酸和寡聚糖直至类脂、噬菌体、病毒和细胞等相互作用的研究。SPR 是制药行业的“金标准”, 被收录进《2020版中国药典》。
钟鼎生物提供的SPR技术服务是基于Biacore仪器,我们可以为客户提供快捷高效的分子互作检测服务,包括活性检测、抗体筛选、表位作图、一致性评价和质量控制检测等各种科研服务。
SPR降低特定角度反射的光强度,当分子结合到传感器表面时,SPR角随金表面折射率变化而变化,而折射率的变化又与金表面结合的分子质量成正比。传感器、微流控系统和SPR检测器三者共同工作,来检测生物分子的相互作用,对反射指数变化的检测结果构成传感图。
新一代SPR系统采用8通道并行检测设计,相比传统单针系统检测速度提升8倍,可快速获取动力学和亲和力数据。其高通量特性特别适合复杂靶点和双抗等新型药物的高效筛选与精准表征,显著缩短检测时间。
Biacore 8K 的超高灵敏度为低丰度、高敏感的蛋白复合体靶点如:GPCRs的检测提供了便利(图2)。GPCRs 通常在整个分析过程中只有一小部分保持生物活性。Biacore 8K能够直接对细胞膜等粗样品进行捕获和检测而不需要对样品进行纯化,从而有效的避免不必要的处理对样品生物活性的影响。
Biacore的基本分析流程包括:实验设计、固定配体、样品进样、芯片再生、数据分析。
(1)蛋白与多糖互作检测
参考文献:Structural Basis of Specific Recognition of Non-Reducing Terminal N-Acetylglucosamine by an Agrocybe aegerita Lectin
Biacore检测AAL2与GlcNAc及GlcNAc β1-3Galβ1-4GlcNAc结合
(2)DNA与蛋白互作检测
参考文献:Natural Variation Underlies Differences in ETHYLENE RESPONSE FACTOR17 Activity in Fruit Peel Degreening
(3)小分子天然产物新靶点发现与验证
参考文献:Highly selective inhibition of IMPDH2 provides the basis of antineuroinflammation therapy