细胞株指纹图谱构建

1985 年，英国来斯特大学的Jeffreys等人报道了DNA指纹图谱的突破性研究。第一次将分离的人源小卫星DNA用作基因探针，同人体核DNA的酶切片段进行Southern杂交，获得了由多个位点上的等位基因组成的长度不等的杂交带图纹，这种图纹极少有两个人完全相同，故称为"DNA指纹"。由于DNA指纹图谱具有多位点性、高变异性、简单而稳定的遗传性，诞生之初就吸引了科学界的聚焦，表现出巨大的实用价值。

利用Southern杂交技术构建细胞株指纹图谱优势

1.准确度高，利用500bp左右的探针，检测到的结果准确性更高，特异性更强；
2.探针33.15通用性强，该探针可应用于各种哺乳细胞株的鉴定和指纹图谱的构建，应用广泛；
3.结果更直观，通过最后的杂交条带，细胞株的鉴定结果一目了然;
4.认可度高，利用该方法鉴定细胞株是得到相关监管机构认可的。

技术路线

样品要求：需要来源相同的细胞株作为阳性对照，来源不同的细胞作为阴性对照

探针设计

多基因座探针（MLP）33.15衍生自人类基因组中的特定高变小环卫星区域，并且将与分布在多种物种的基因组中的重复DNA序列杂交，例如， 人类，仓鼠（CHO，BHK），猿猴。 MLP33.15的个体特异性和多物种杂交使其成为细胞库质量控制的有力工具，能够检测种间和种内细胞污染。

使用一个含有多拷贝数核心序列的多基因座DNA探针（如33.6探针或33.15探针），在低强度条件下（较低温度、较高盐浓度）同时与许多VNTR基因座（约1000个）杂交，经电泳显示其中50-100个基因座的杂交结果，获得由一系列DNA片段谱带组成的图像。

不同探针比较

探针	DNA片段大小	个体平均片段数	A的片段在B中出现的概率	在同一个体中测得所有片段同时在另一无关个体中存在概率
MYO	2.3-24	14	0.21	4×10-9
α-珠蛋白-3'HVR	3.0-24	12	0.24	8.1×10-10
JL-02	4.0-24	17	/	6.6×10-15
33.15（欧洲）	4.0-24	15	0.18	3×10-11
33.6（欧洲）	4.0-24	11	0.19	/
33.15（中国）	4.0-24	20	0.176	1.03×10-15
33.6（中国）	4.0-24	16	0.187	1.53×10-11

DNA指纹图谱应用

1、DNA指纹识别能够检测种间和种内细胞污染，是细胞库质量控制的有力工具。
2、在人类医学中被用于个体鉴别、确定亲缘关系、医学诊断及寻找与疾病连锁的遗传标记；在动物进化学中可用于探明动物种群的起源及进化过程；在物种分类中，DNA指纹识别是一种强大的用于细胞系鉴定的技术，其他测定可能仅提供功能性可以确认物种的水平信息。在作物的基因定位及育种上也有非常广泛的应用。

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