杆状病毒的分类与分子生物学

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杆状病毒的分类与分子生物学

杆状病毒属于杆状病毒科(Baculoviridae),分为核多角体病毒属和颗粒体病毒属,病毒粒子呈杆状,是一类专一性感染节肢动物并具有囊膜的 DNA 病毒。基因组 DNA 以超螺旋形式压缩包装在杆状衣壳内,大小在 90 ~180 kb 之间。

杆状病毒表达系统

杆状病毒的分类

  杆状病毒基因组可在昆虫细胞核复制和转录, DNA 复制后组装在杆状病毒的核衣壳内,因其具有较大的柔韧性,可容纳较大片段的外源 DNA 插入而成为表达大片段 DNA 的理想载体。其中,目前用作外源基因表达载体的杆状病毒主要为核型多角体病毒。核型多角体病毒在整个病毒生活周期中以包涵体病毒和细胞外芽生病毒两种形式存在,它们在病毒感染中扮演着不同的角色。

  OV 病毒是昆虫间水平感染的病毒形式,昆虫往往是食入污染 OV 的食物后引起感染;OV 病毒外层包裹了一层相对分子质量为 29000000 的多角体蛋白,它能保护病毒颗粒在外界传播过程中免遭环境因素的破坏而失活,并能使病毒颗粒在适当的位置释放,引起感染。

  BV 病毒是个体内细胞间的感染形式,由细胞芽生出 BV,进入血淋巴系统中感染其他部位的细胞或直接在临近细胞内感染。

  目前已知基因组全序列的核型多角体杆状病毒有苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒、家蚕核多角体病毒、黄杉毒蛾多核衣壳核多角体病毒、舞毒蛾多核衣壳核多角体病毒、甜菜夜蛾多核衣壳核多角体病毒、棉铃虫核型多角体病毒,以及斜纹夜蛾核型多角体病毒,其中以 AcMN-PV 研究最为深入。

杆状病毒表达阶段

  AcMNPV 的基因表达分为 4 个阶段:立早期基因表达、早期基因表达、晚期基因表达和极晚期基因表达。

  前两个阶段的基因表达早于 DNA 复制,而后两个阶段的基因表达则伴随着一系列的病毒 DNA合成。其中在极晚期基因表达过程中,有两种高效表达的蛋白——多角体蛋白和 P10 蛋白。多角体蛋白是形成包涵体病毒的主要成分,感染后期在细胞中的积累可高达 30% ~50%,是病毒复制的非必需成分,但对病毒粒子有一定的保护作用。

  另一类高效表达的极晚期蛋白为 P10 蛋白,也是一类病毒复制的非必需成分,可在细胞中形成纤维状物质,这可能与细胞溶解有关。多角体基因和 P10 基因的启动子具有较强的启动能力,且均为病毒复制的非必需成分,因此这两个基因位点成为了杆状病毒表达载体系统理想的外源基因插入位点。

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