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噬菌体展示技术服务

噬菌体展示技术相对于传统的杂交瘤技术，在周期时间、筛选范围、费用成本方面均有着突出的优势。噬菌体展示筛库过程简单高效，能在较短时间内获取亲和力较强的抗体。

钟鼎生物在抗体发现领域深耕多年，建有成熟的噬菌体展示技术平台、能够一站式提供噬菌体展示文库构建、噬菌体展示文库筛选、抗体人源化、抗体亲和力成熟、抗原表位筛选等技术服务。


钟鼎噬菌体展示服务特色



自主研发的ZoonClearTM噬菌体展示系统，可根据客户的特殊需求定制个性化文库。
极具竞争力的价格。
1vs1专属私人客服，实时汇报项目进展。
噬菌体展示抗体文库构建、噬菌体展示多肽文库构建、抗原表位筛选、抗体亲和力成熟、抗体人源化全套服务。

噬菌体展示技术服务流程 

噬菌体展示技术流程

服务详情 

步骤 周期 交付材料 询价
1.构建噬菌体抗体库  5折 详情请在线咨询
或
拨打热线400-066-8086
A.利用免疫的cDNA，扩增出scFv基因片段，构建M13单链丝状噬菌体展示抗体免疫文库。
B.抗体库质量：
（1）scFv抗体片段有效插入率﹥99%
（2）抗体库容量达到109次方
C.从文库中随机挑取96个克隆，对其中30个克隆测序，分析scFv抗体片段的多样性和正确率，保证正确率≥80%，另外提供30个克隆用于测序验证。		 4-6周 提供质检报告与抗体库
①完整的项目报告和原始数据，报告需包含实验流程、分析评估实验的主要操作步骤、以及详细的实验结果；
②共30个文库随机克隆的甘油菌和测序引物；
③噬菌体展示抗体免疫文库的Kit（包含文库甘油菌1ml × 10支和文库噬菌粒质粒10 μg）；
2.抗体库筛选  5折
A.筛选方案确定：根据项目实际情况，选择不同的筛选方案，如竞争筛选，固相筛选，液相筛选，细胞筛选，负筛选等筛选方法。
B.淘选： 对抗原蛋白进行SDS-PAGE分析验证，并进行生物素标记；针对生物素化靶点蛋白，利用链霉亲和素预包被的ELISA Plates，淘筛免疫文库；抗原施压法进行2-3轮淘筛，确定充分富集且靶点筛选组的滴度要远高于对照筛选组。
C.结合筛选：选择从Output克隆中，分别挑取单克隆进行阳性克隆鉴定。经培养和Phage Rescue后，进行Monoclonal Phage ELISA检测。
D.测序分析:鉴定出抗原结合强阳性的scFv抗体克隆，测序分析，比对序列制作进化树，选择序列独特的克隆。
E.表达验证：少量表达阳性scFv克隆，利用Soluble ELISA检测对靶点抗原的特异性结合能力。		 4-6周 5个以上的特异性克隆
3.抗体表达纯化
A.将抗体基因克隆至真核表达载体。 3-4周 高纯度抗体100-500μg
4.亲和力测定
采用Biacore 测定抗体的亲和力
采用Nicoya LSPR 测定抗体的亲和力
采用Fortebio octet 测定抗体的亲和力		 1周
1周
1周		 亲和力测定数据
5.抗体人源化（通过自主开发软件AbsYs分析抗体可变区并进行抗体人源化设计。）
A.识别FR、CDR、关键残基、PTMs。
B.通过同源比对，考虑可变区一致性及相似性、关键残基、PTMs、稳定性等因素，选择更好的人源抗体Germline FR作为模板，与CDR 重组，设计初始人源化抗体。
C.分析抗体序列和结构，确定需要回复突变的关键残基，设计不同数量的回复突变VH。
D.将人源化基因克隆至真核表达载体，转染293瞬时表达获得100-500μg 纯化抗体。
E.结合活性及亲和力检测。		 6-8周 至少一个人源化抗体（亲和力、表达量与原抗体相当）

保密性说明

南京钟鼎生物技术有限公司拥有众多商业合作伙伴，深知保密工作对这些公司的重要性，我们极度重视保密性，在与您沟通之前先签署保密协议，并采用多重的防火墙及保障举措，以保护您的隐私权。

保护您的商业机密是钟鼎生物最基本的职业素养!


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