噬菌体展示羊驼纳米抗体文库制备

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服务概述

噬菌体展示羊驼纳米抗体文库制备

噬菌体展示技术(Phage Display)一种基因表达产物和亲和选择相结合的技术,是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白的表达而表达,同时,外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。

噬菌体

科研者已开发出的噬菌体展示系统有:单链丝状噬菌体展示系统、λ噬菌体展示系统、T4噬菌体展示系统等多种噬菌体展示系统。

噬菌体展示羊驼纳米抗体制备步骤:

1、采取免疫或未免疫的羊驼外周血液;
2、提取总的mRNA,反转录成cDNA;
3、利用巢式PCR扩增VHH,使用限制性内切酶酶切噬菌体展示载体及VHH并连接两个片段;
4、将连接产物电转化至感受态TGl中,构建天然或免疫的羊驼源噬菌体展示纳米抗体文库。

噬菌体展示技术与其他两个技术的比较

噬菌体展示比较
内容 免疫血清 杂交瘤技术 噬菌体展示技术
抗体形式 多克隆抗体 单克隆抗体 单克隆抗体重组抗体
宿主细胞 N/A 杂交瘤 细菌
筛选范围 N/A 0-103 107-109
基因获取 N/A 再克隆 直接
时间 几个月 几个月 几周
费用
生产量 有限 有限 无限
操作 简单 复杂 相对简单
免疫 不可避免 不可避免 可避免
人源抗体 可以
应用前景 有限 有限 范围更广

噬菌体展示技术的应用

抗原抗体库的建立、抗原表位研究、病原检测、疫苗研究、药物设计、基因治疗、细胞信号转导研究等。

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