胶体金技术常见问题解析

胶体金技术常见问题解析

胶体金

1、胶体金试纸条样品垫上样不吸收怎么办?

做好的胶体金试纸条,检测纯水,上样的时候水在样品垫上成一球形,根本不吸收,也不往前走,这个问题很让人恼火,那我们首先要确定样品垫是什么材质的?
如果本身就是疏水性的,出现这样的情况很正常,建议在处理液中加入一定量的表面活性剂
如果是亲水性的,出现这样的情况,可能是BSA固化引起的,建议加一些T-20同时降低BSA的使用量。

2、胶体金吸附的玻璃膜在NC膜上不跑怎么办?

总的来说,有以下几点可能
1、胶体金形状不规则,很容易死;
2、胶体金缓冲液问题
需要加一些表面活性剂,用来释放,建议加T- 20 ,若效果不理想可以加SDS-L或SDS-F;要加BSA和PEG来保护抗体;
3、标记垫处理不好
标记垫要喷糖来封闭玻璃纤维,避免胶体金和其静电吸附;添加温和的表面活性剂如SDS-L来增加释放。
4、样本垫
如果上述情况都没有问题,但效果仍然不理想,那么在样本垫加SDS-L,浓度可以加大7%试试。

3、胶体金C线不明显怎么办?

如果检测线明显但二抗线不明显,问题不大,可能是二抗线的点膜浓度低了,或者因阳性过高导致检测线结合和大量的金,自然对照线颜色变浅。
如果检测线也不明显,基本就是标记有问题了,重新摸标记条件吧

4、试纸条出现假阳性怎么办?

1、污染,比如器皿或者缓冲液的污染
2、金在抗体标记完毕后封闭是否彻底
3、选用的缓冲液PH或者离子强度是否合适
4、金标垫或者样品垫处理用的什么,有的物质浓度不对或者添加后就能造成假阳性
5、T线点膜的缓冲液可能有问题

5、胶体金标记的SPA不稳定是什么情况?

1.爬行过程中是否出现问题?比如说背景退白变慢、背景不干净了或者在膜边缘出现死金。
2.配方有问题的可能性比较大,用聚酯膜做金垫要筛选适当的聚酯膜,有些厂家的聚酯膜对稳定性确实不好。配方中亲水性物质或保护剂的量不够也可造成稳定性不好。
3、金垫受潮后稳定性也会受影响

6、胶体金灵敏度降低的问题

金标抗体的活性降低,原因一般有以下几种情况:
1、首要是干燥,含水量越高,活性越容易丢失。环境湿度尤其重要,还有烤的要干。
2、铝箔袋的密闭性要好,不要贪便宜买差的铝箔袋。
3、加稳定剂。蔗糖、海藻糖、PVP、L-30、L-90D,and so on。

7、胶体金标记蛋白干燥时,胶体金颜色变紫色甚至灰白色?

原因可能是干燥过程湿度大,温度高,时间长。
解决方法:控制干燥过程的温湿度,并且金条干燥时间不得超过5小时。